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臺(tái)盼藍(lán)染色液

臺(tái)盼藍(lán)染色液

產(chǎn)品編號(hào):TB0515

產(chǎn)品規(guī)格:50ml

數(shù)量
價(jià)格 ¥150

臺(tái)盼藍(lán)染色液(Trypan Blue Staining Solution

●     產(chǎn)品組成:

組分貨號(hào)

名稱

規(guī)格

貯存

TB0515

臺(tái)盼藍(lán)染色溶液

50 ml

4

 

說明書

一份

 

● 產(chǎn)品簡介:

臺(tái)盼藍(lán)(Trypan Blue)或稱臺(tái)盼蘭、錐蟲藍(lán),是細(xì)胞活性染料,常用于檢測細(xì)胞膜的完整性與細(xì)胞的存活率,是組織和細(xì)胞培養(yǎng)中最常用的死細(xì)胞鑒定染色方法之一。正常的活細(xì)胞細(xì)胞膜結(jié)構(gòu)完整,能夠排斥臺(tái)盼藍(lán),細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色;而喪失活性或細(xì)胞膜不完整的細(xì)胞可被臺(tái)盼藍(lán)染成藍(lán)色。臺(tái)盼藍(lán)可被巨噬細(xì)胞吞噬,故可用于巨噬細(xì)胞的活體染色劑。凋亡小體也有臺(tái)盼藍(lán)拒染現(xiàn)象,因此臺(tái)盼藍(lán)溶液不能區(qū)分凋亡細(xì)胞和死亡細(xì)胞。臺(tái)盼藍(lán)染色后,通過顯微鏡下直接計(jì)數(shù)或顯微鏡下拍照后計(jì)數(shù),就可以對細(xì)胞存活率進(jìn)行比較精確的定量。染色時(shí)間只需 3-5 分鐘,操作簡單。

● 貯存:

4℃保存,一年有效。

● 操作步驟:

1.收集細(xì)胞:

對于貼壁細(xì)胞先用胰酶消化液消化細(xì)胞,用適量細(xì)胞重懸液(Hank’s液或生理鹽水)重懸細(xì)胞;對于懸浮細(xì)胞,1000-2000g離心1分鐘收集細(xì)胞,棄上清,用適量細(xì)胞重懸液重懸細(xì)胞。

2.臺(tái)盼藍(lán)染色:

吸取100微升重懸的細(xì)胞到1.5 ml離心管內(nèi),加入100微升臺(tái)盼藍(lán)染色液,輕輕混勻,染色3分鐘  (染色3分鐘時(shí)間已經(jīng)足夠,但染色時(shí)間可以更長一些,但不宜超過10分鐘)。

3.計(jì)數(shù):

  吸取少量經(jīng)過染色的細(xì)胞,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。通常如果要比較精確地進(jìn)行定量,每個(gè)細(xì)胞樣品至少數(shù)500個(gè)細(xì)胞,數(shù)出藍(lán)色細(xì)胞和細(xì)胞總數(shù)。

細(xì)胞存活率=(細(xì)胞總數(shù)-藍(lán)色細(xì)胞數(shù))/細(xì)胞總數(shù)×100%

注意事項(xiàng):

1. 染色時(shí)間不能太長,否則活細(xì)胞也會(huì)逐漸積累染料而染成顏色,使檢測結(jié)果偏低。

2. 為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

實(shí)驗(yàn)示例:

Jurkat細(xì)胞臺(tái)盼藍(lán)染色結(jié)果,深藍(lán)色細(xì)胞為死細(xì)胞


 
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